এই প্রবন্ধে প্রবর্তিত বিশ্লেষণ পদ্ধতিটি, চীন গণপ্রজাতন্ত্রের ফার্মাকোপিয়ার ২০২০ সংস্করণে অ্যাসিক্লোভির পরীক্ষার পদ্ধতিতে উল্লেখ করা হয়েছে,একটি ডিএডি ডিটেক্টর সহ ওয়ায়েলের উচ্চ কার্যকারিতা তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফ এলসি 3200 সিরিজ ব্যবহার করে.
1যন্ত্রের বিন্যাস এবং পরীক্ষার পদ্ধতি
2.১ যন্ত্রের বিন্যাস
| না. |
নাম |
Qty |
| 1 |
P3210Q চতুর্থাংশ পাম্প |
1 |
| 2 |
CT3400 কলাম ওভেন |
1 |
| 3 |
AS3210 অটোস্যাম্পলার |
1 |
| 4 |
DAD3260 DAD ডিটেক্টর |
1 |
| 5 |
নোভা অ্যাটম পিসি১৮ ৪.৬x২৫০ মিমি ৫ মাইক্রোমিটার |
1 |
| 6 |
ক্রোম্যাটোগ্রাফি ওয়ার্কস্টেশন |
1 |
2.২ পরীক্ষার পদ্ধতি
2.2.১ রিএজেন্টস প্রস্তুতি
টেবিল ২ রিএজেন্টের তালিকা
| না. |
রিএজেন্টস |
বিশুদ্ধতা |
|
1
2
3
4
5
|
মেথানল
ফসফরিক এসিড
সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড
অ্যাসাইক্লোভির
গুয়ানিন
|
ক্রোম্যাটোগ্রাফিক বিশুদ্ধতা ((LC)
GR
এমওএস
৯৮%
৯৯%
|
2.2.1.১ পরীক্ষার সমাধানঃ ৪০ মিলিগ্রাম নমুনা নিয়ে ২০০ মিলিগ্রাম পরিমাপ কলসে ঢোকান, ২ মিলিগ্রাম ০.৪% সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড যোগ করে দ্রবীভূত করুন, তারপর ২৫ মিলিগ্রাম ০.৪% সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড যোগ করুন।১% (ভি/ভি) ফসফরিক এসিড সলিউশন এবং এটি পানি দিয়ে স্কেল পর্যন্ত পাতলা করুনভালো করে ঝাঁকিয়ে দাও।
2.2.1.2 রেফারেন্স সলিউশনঃ পরীক্ষার সমাধানের ১ মিলিটারের মধ্যে ১০০ মিলিটার পরিমাপ কলসে নিয়ে নিন, ০.১% ফসফরিক অ্যাসিড সলিউশনের ৫ মিলিটারের যোগ করুন, স্কেল পর্যন্ত পানি দিয়ে হ্রাস করুন এবং ভালভাবে নাড়ুন।
2.2.1.৩ গুয়ানিন নিয়ন্ত্রণ সংরক্ষণের সমাধানঃ ১০ মিলিগ্রাম গুয়ানিনের রেফারেন্স ৫০ মিলিগ্রাম পরিমাপ কলসে নিন, ৫ মিলিগ্রাম ০.৪% সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড দ্রবণ যোগ করে দ্রবীভূত করুন, তারপর ০.৫ মিলিগ্রাম যোগ করুন।১% ফসফরিক এসিড সলিউশন, পানি দিয়ে স্কেল পর্যন্ত পাতলা করুন, ভালভাবে ঝাঁকুন।
2.2.1.4 গুয়ানিনের রেফারেন্স সলিউশনঃ ১ মিলিগ্রাম গুয়ানিনের রেফারেন্স সলিউশন ১০০ মিলিগ্রাম বালিশে নিয়ে পানি দিয়ে পাতলা করুন এবং ভাল করে ঝাঁকুন।
2.2.1.5 সিস্টেম উপযুক্ততা সমাধানঃ রেফারেন্স সলিউশন এবং গুয়ানিন রেফারেন্স সলিউশন উভয় থেকে যথাযথ পরিমাণ নিন, সমান পরিমাণে মিশ্রিত করুন এবং ভালভাবে ঝাঁকুন।
2.2.২ ক্রোম্যাটোগ্রাফির অবস্থা
টেবিল ৩ ক্রোম্যাটোগ্রাফি শর্তাবলী
| ক্রোম্যাটোগ্রাফি কলাম |
নোভা অ্যাটম পিসি১৮ ক্রোম্যাটোগ্রাফি কলাম, ৪.৬*২৫০ মিমি, ৫ মাইক্রোমিটার |
| মোবাইল ফেজ |
মোবাইল ফেজ এ: পানি |
মোবাইল ফেজ বিঃ মেথানল |
| প্রবাহের হার |
১ এমএল/মিনিট |
| কলাম তাপমাত্রা |
৩৫°সি |
তরঙ্গদৈর্ঘ্য |
254nm |
| ইনজেকশন ভলিউম |
২০ μl |
টেবিল ৪ মোবাইল ফেজ রেসিও
| সময় (মিনিট) |
মোবাইল ফেজ এ |
মোবাইল ফেজ বি |
| 0 |
94 |
6 |
| 15 |
94 |
6 |
| 40 |
65 |
35 |
| 41 |
94 |
6 |
| 51 |
94 |
6 |
3পরীক্ষার ফলাফল
3.১ সিস্টেমের উপযুক্ততার সমাধান
চিত্র ১ সিস্টেম উপযুক্ততা সমাধানের পরীক্ষা ক্রোম্যাটোগ্রাম
টেবিল ৫ টেস্ট ডেটা সিস্টেমের উপযুক্ততার সমাধান
| না. |
যৌগিক |
সংরক্ষণের সময় |
পিক এলাকা |
তাত্ত্বিক প্লেট নম্বর |
বিচ্ছেদ |
| 1 |
গুয়ানিন |
5.698 |
138.675 |
17173 |
12.334 |
| 2 |
অ্যাসাইক্লোভির |
8.425 |
139.902 |
15786 |
n.a. |
দ্রষ্টব্যঃ উপরের গ্রাফ এবং টেবিলের তথ্য থেকে দেখা যায় যে অ্যাসাইক্লোভির এবং গুয়ানিনের শীর্ষের আকার ভাল এবং উচ্চ তাত্ত্বিক প্লেট সংখ্যা রয়েছে। বিচ্ছেদের ডিগ্রি 3 এর বেশি।0, যা ফার্মাকোপিয়ার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।
3.২ পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা
চিত্র ২ পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা ক্রোম্যাটোগ্রাম সিস্টেমের উপযুক্ততার 6 টি ইনজেকশন
টেবিল ৬ পুনরাবৃত্তিযোগ্যতার তথ্য ৬ টি ইনজেকশনের সিস্টেম উপযুক্ততা সমাধান সংরক্ষণের সময়
| নমুনা |
না. |
গুয়ানিন |
অ্যাসাইক্লোভির |
|
সংরক্ষণের সময়
|
1 |
5.698 |
8.408 |
| 2 |
5.701 |
8.415 |
| 3 |
5.705 |
8.411 |
| 4 |
5.701 |
8.405 |
| 5 |
5.705 |
8.401 |
| 6 |
5.705 |
8.398 |
| RSD (%) |
0.048 |
0.074 |
টেবিল ৭ পুনরাবৃত্তিযোগ্যতার তথ্য ৬ টি সিস্টেম উপযুক্ততা সমাধানের ইনজেকশন পিক এলাকা
| নমুনা |
না. |
গুয়ানিন |
অ্যাসাইক্লোভির |
|
পিক এলাকা
|
1 |
136.997 |
138.836 |
| 2 |
138.496 |
139.117 |
| 3 |
137.783 |
139.505 |
| 4 |
136.663 |
138.204 |
| 5 |
137.755 |
137.968 |
| 6 |
137.789 |
139.374 |
| RSD (%) |
0.475 |
0.452 |
দ্রষ্টব্যঃ উপরের টেবিলের তথ্য অনুসারে, সিস্টেম উপযুক্ততা সমাধানের মধ্যে গুয়ানিন এবং এসিক্লোভিরের ধরে রাখার সময়টির RSD 0.048% এবং 0.074%, এবং পিক এলাকার RSD 0.475% এবং 0.৪৫২%, যথাক্রমে। পুনরুত্পাদনযোগ্যতার ফলাফল ভাল এবং পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।
3.৩ পরীক্ষার সমাধান
চিত্র ৩ পরীক্ষামূলক নমুনার ক্রোম্যাটোগ্রাম
টেবিল ৮ পরীক্ষার নমুনার পরীক্ষার তথ্য
| নমুনা |
যৌগিক |
সংরক্ষণের সময় |
পিক এলাকা |
শীর্ষ উচ্চতা |
তাত্ত্বিক প্লেট নম্বর |
| পরীক্ষার নমুনা |
অ্যাসাইক্লোভির |
8.385 |
22385.51 |
1806.31 |
10082 |
দ্রষ্টব্যঃ উপরের ক্রোম্যাটোগ্রাম এবং প্রদর্শিত তথ্য অনুযায়ী, পরীক্ষার নমুনার ক্রোম্যাটোগ্রামে অন্য কোন পিক নেই, এবং পিকের আকৃতি ভাল, তত্ত্বগত প্লেট সংখ্যা উচ্চ,যা ফার্মাকোপিয়ার সীমাবদ্ধতার প্রয়োজনীয়তাগুলি পূরণ করে গ্যানিন এবং অন্যান্য পদার্থের অধীনে অ্যাসিক্লোভির পরীক্ষার পদ্ধতিতে.
3.4 দ্রষ্টব্য
সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড অত্যন্ত ক্ষয়কারী, তাই দ্রবণ প্রস্তুত করার সময় সতর্কতা অবলম্বন করুন।
4উপসংহার
এই প্রবন্ধে প্রবর্তিত বিশ্লেষণ পদ্ধতিটি, চীন গণপ্রজাতন্ত্রের ফার্মাকোপিয়ার ২০২০ সংস্করণে অ্যাসিক্লোভির পরীক্ষার পদ্ধতিতে উল্লেখ করা হয়েছে,একটি ডিএডি ডিটেক্টর সহ ওয়ায়েলের উচ্চ কার্যকারিতা তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফ এলসি 3200 সিরিজ ব্যবহার করেপরীক্ষামূলক ফলাফল দেখায় যে এসিক্লোভির এবং গুয়ানিনের শীর্ষের আকার ভাল এবং উচ্চ তাত্ত্বিক প্লেট সংখ্যা রয়েছে। বিচ্ছেদের ডিগ্রি 3 এর চেয়ে বেশি।0সিস্টেম উপযুক্ততা সমাধানগুলিতে গুয়ানিন এবং এসিক্লোভিরের সংরক্ষণের সময় RSDs 0.048% এবং 0.074%, এবং শীর্ষ এলাকার RSDs 0.৪৭৫% এবং ০.452%, যথাক্রমে। পুনরাবৃত্তিযোগ্যতার ফলাফল ভাল এবং পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।পরীক্ষার নমুনার ক্রোম্যাটোগ্রামে অন্য কোন পিক নেই এবং পিকের আকৃতি ভাল এবং তত্ত্বগত প্লেট সংখ্যা উচ্চ, যা গুয়ানিন এবং অন্যান্য পদার্থের অধীনে অ্যাসাইক্লোভির পরীক্ষার পদ্ধতির সীমাবদ্ধতার জন্য ফার্মাকোপিয়ার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।
আপনার বার্তাটি 20-3,000 টির মধ্যে হতে হবে!
