তরল ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা খাদ্যে সাতটি প্যারাবেনের নির্ধারণ

প্যারাবেন (p-হাইড্রোক্সিবেনজোয়েট), অত্যন্ত কার্যকরী এবং বিস্তৃত-স্পেকট্রাম সংরক্ষণকারী হিসাবে, খাদ্য (যেমন সয়া সস, ভিনেগার, পানীয়, জ্যাম ইত্যাদি), প্রসাধনী এবং ফার্মাসিউটিক্যালস-এর মতো বিভিন্ন ক্ষেত্রে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। তাদের অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল কার্যকারিতা এবং নিরাপত্তা সরাসরি পণ্যের স্থিতিশীলতা এবং ভোক্তাদের স্বাস্থ্যের উপর প্রভাব ফেলে। এই পরীক্ষাটি "GB 5009.31-2025 ন্যাশনাল ফুড সেফটি স্ট্যান্ডার্ড — খাবারে প্যারাবেনের পরিমাণ নির্ধারণ" এর উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছে, যেখানে বিশ্লেষণের জন্য একটি DAD ডিটেক্টর সহ Wayeal LC3500 সিরিজের উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেম ব্যবহার করা হয়েছে।

কীওয়ার্ড: খাদ্য সংযোজন; প্যারাবেন; p-হাইড্রোক্সিবেনজোয়েট; উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি।

1. যন্ত্র ও বিকারক

1.1 উচ্চ পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফির কনফিগারেশন তালিকা

সারণী 1 যন্ত্র কনফিগারেশনের তালিকা

1.2 বিকারক এবং স্ট্যান্ডার্ড

সারণী 2 বিকারক এবং স্ট্যান্ডার্ডের তালিকা

1.3 পরীক্ষার উপাদান এবং সহায়ক সরঞ্জাম

বিশ্লেষণাত্মক ব্যালেন্স

আলট্রাসনিক ক্লিনার

ভোর্টেক্স মিক্সার

2. পরীক্ষার পদ্ধতি

2.1 বিকারক প্রস্তুতি

2.1.1 প্যারাবেন যৌগের মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশন: উপযুক্তভাবে প্যারাবেন যৌগের মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড নিন এবং 0.2mg/L, 0.5mg/L, 1.0mg/L, 2.0mg/L, 5.0mg/L, 10mg/L, 20mg/L, এবং 50mg/L ভর ঘনত্ব সহ মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশন প্রস্তুত করতে 30% মিথানল-জল দিয়ে মিশ্রিত করুন।

2.1.2 নমুনা প্রি ট্রিটমেন্ট:

5g (0.01g পর্যন্ত নির্ভুল) নমুনা একটি 50mL স্নাতকযুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউবে ওজন করুন (কার্বোনেটেড পানীয়ের জন্য ওজন করার আগে একটি আলট্রাসনিক ক্লিনার-এ 10 মিনিটের জন্য আলট্রাসনিক ডিগ্যাসিং প্রয়োজন)। 30mL মিথানল-জল দ্রবণ (3+7) যোগ করুন, 3 মিনিটের জন্য ভোর্টেক্স করুন এবং 20 মিনিটের জন্য সোনাইকেট করুন। তারপর, মোট আয়তন 40mL করতে মিথানল-জল দ্রবণ (3+7) যোগ করুন। 3 মিনিটের জন্য 6000r/min-এ সেন্ট্রিফিউজ করুন, সুপারন্যাটেন্ট ফিল্টার করুন এবং পরিশোধনের জন্য ফিলট্রেট নিন। পরপর 5mL মিথানল এবং 5mL জল দিয়ে কঠিন-ফেজ নিষ্কাশন (SPE) কলাম সক্রিয় করুন। পরিশোধিত হওয়ার জন্য দ্রবণটি সক্রিয় SPE কলামে স্থানান্তর করুন। পরপর 5mL জল এবং 5mL মিথানল-জল দ্রবণ (3+7) দিয়ে কলামটি ধুয়ে ফেলুন, তারপর 6mL মিথানল দিয়ে এলুট করুন। এলুয়েট সংগ্রহ করুন, জল দিয়ে 10mL পর্যন্ত মিশ্রিত করুন, একটি ঝিল্লি দিয়ে ফিল্টার করুন এবং বিশ্লেষণের জন্য উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফে ইনজেক্ট করুন।

3. পরীক্ষার ফলাফল

3.1 সিস্টেম উপযুক্ততা পরীক্ষা

চিত্র 1 প্যারাবেন যৌগের জন্য স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ক্রোমাটোগ্রাম

সারণী 3 প্যারাবেন যৌগ স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের পরীক্ষার ফলাফল

সিস্টেম উপযুক্ততা পরীক্ষাটি দেখায় যে প্রতিটি ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর ভালো আকার, উচ্চ তাত্ত্বিক প্লেট সংখ্যা, আশেপাশের অমেধ্য শিখর থেকে কোনো হস্তক্ষেপ নেই এবং রেজোলিউশন মান 1.5-এর বেশি, যা পরীক্ষার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

3.2 পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষা

চিত্র 2 1.0mg/L প্যারাবেন যৌগের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষা ক্রোমাটোগ্রাম (6টি ইনজেকশন)

সারণী 4 1.0mg/L প্যারাবেন যৌগের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষার ফলাফল (6টি ইনজেকশন)

পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষা দেখায় যে 1.0mg/L প্যারাবেন যৌগ স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ছয়টি ধারাবাহিক ইনজেকশনের পরে, ধারণের সময়ের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা 0.2%-এর নিচে ছিল এবং শিখর এলাকার পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা 1.0%-এর নিচে ছিল, যা ভালো পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা নির্দেশ করে।

3.3 লিনিয়ার পরীক্ষা

চিত্র 3 স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ পরীক্ষার ক্রোমাটোগ্রাম

লিনিয়ারিটি পরীক্ষাটি দেখায় যে 0.2–50mg/L-এর মধ্যে, সাতটি প্যারাবেন যৌগের মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড কার্ভগুলি সবই 0.9999-এর বেশি লিনিয়ার পারস্পরিক সম্পর্ক সহগ দেখায়, যা চমৎকার লিনিয়ারিটি নির্দেশ করে।

3.4 নির্ভুলতা পরীক্ষা

চিত্র 4 নির্ভুলতা পরীক্ষা ক্রোমাটোগ্রাম

সারণী 5 প্যারাবেন যৌগের নির্ভুলতা পরীক্ষার ফলাফল

নির্ভুলতা পরীক্ষাটি দেখায় যে স্পাইক করা নমুনার সাতটি প্যারাবেন যৌগের পুনরুদ্ধার 97.6% থেকে 104.8% পর্যন্ত ছিল, যা ভালো নির্ভুলতা নির্দেশ করে।

3.5 একটি ব্র্যান্ডের পানীয় পরীক্ষা

চিত্র 5 একটি ব্র্যান্ডের পানীয় পরীক্ষার ক্রোমাটোগ্রাম

নমুনা পরীক্ষা ইঙ্গিত করে যে একটি নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডের পানীয়তে সাতটি প্যারাবেন যৌগ সনাক্ত করা যায়নি।

4. উপসংহার

এই পরীক্ষাটি "GB 5009.31-2025 ন্যাশনাল ফুড সেফটি স্ট্যান্ডার্ড — খাবারে প্যারাবেনের পরিমাণ নির্ধারণ" এর উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছে, যেখানে বিশ্লেষণের জন্য একটি DAD ডিটেক্টর সহ Wayeal LC3500 সিরিজের উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেম ব্যবহার করা হয়েছে। পরীক্ষার ফলাফল দেখায় যে সিস্টেম উপযুক্ততা পরীক্ষায়, প্রতিটি যৌগের শিখর ভালো আকার এবং উচ্চ তাত্ত্বিক প্লেট সংখ্যা দেখায়, যা পরীক্ষার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে। 1.0 mg/L প্যারাবেন স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ছয়টি ধারাবাহিক ইনজেকশন 0.2%-এর নিচে ধারণের সময়ের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা এবং 1.0%-এর নিচে শিখর এলাকার পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা দেখিয়েছে, যা ভালো পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা নির্দেশ করে। 0.2–50 mg/L-এর মধ্যে, লিনিয়ার পারস্পরিক সম্পর্ক সহগগুলি সবই 0.9999-এর বেশি, যা ভালো লিনিয়ারিটি নির্দেশ করে। স্পাইক করা নমুনার সাতটি প্যারাবেন যৌগের পুনরুদ্ধার 97.6% থেকে 104.8% পর্যন্ত ছিল, যা ভালো নির্ভুলতা নির্দেশ করে। স্পাইক করা নমুনার সাতটি প্যারাবেন যৌগের পুনরুদ্ধার 97.6% থেকে 104.8% পর্যন্ত ছিল, যা ভালো নির্ভুলতা প্রমাণ করে। নমুনা পরীক্ষায় সাতটি প্যারাবেন যৌগ সনাক্ত করা যায়নি। উপরের সমস্ত ডেটা স্ট্যান্ডার্ড পদ্ধতিতে নির্দিষ্ট করা যন্ত্রের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।