WAYEAL LCMS-TQ9200 LCMS/MS সিস্টেম দ্বারা মরিচের গুঁড়োতে রোডামিন বি নির্ধারণ

রোডামিন বি (এছাড়াও রোজ রেড বি বা বেসিক ভায়োলেট ১০ নামেও পরিচিত) একটি সিন্থেটিক বেসিক ফ্লুরোসেন্ট ডাই যা জ্যানথেন রাসায়নিক শ্রেণীর অন্তর্গত।এই পদার্থ নিজেই একটি উজ্জ্বল গোলাপী-লাল রঙ প্রদর্শন করে এবং জল এবং ইথানল মত মেরু দ্রাবক মধ্যে সহজে দ্রবণীয়প্রাথমিকভাবে, এটি টেক্সটাইল, মুদ্রণ, এবং ফ্লুরোসেন্ট লেবেলিং সহ শিল্প ক্ষেত্রে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। এর কম খরচে এবং শক্তিশালী রঙিন ক্ষমতা কারণে, এটি একটি শক্তিশালী রঙিন উপাদান।কিছু অসাধু ব্যবসায়ীরা অবৈধভাবে রং করার উদ্দেশ্যে খাদ্য পণ্যগুলিতে এটি যোগ করেছেন, যেমন চিলি পাউডার, সিচুয়ান মরিচ, মাংসের পণ্য এবং মশলা, এটি একটি গুরুত্বপূর্ণ দূষণকারী যা খাদ্য নিরাপত্তা বিপন্ন করে।
রোডামিন বি মানবদেহের জন্য স্পষ্টতই বিষাক্ত। এটি পাচনতন্ত্র বা ত্বকের মাধ্যমে শরীরের মধ্যে প্রবেশ করতে পারে, স্বাভাবিক শারীরবৃত্তীয় বিপাকের সাথে হস্তক্ষেপ করে। উপরন্তু,এটি সম্ভাব্য ক্যান্সারজেনিক এবং মিউটেজেনিক ঝুঁকি তৈরি করে. ফলস্বরূপ, এটি একাধিক দেশে খাদ্যের মধ্যে নিষিদ্ধ একটি অ-খাদ্য পদার্থ হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছে। এটি খাদ্য নিরাপত্তা তত্ত্বাবধানের মূল লক্ষ্য,এবং এর সনাক্তকরণের হার বিভিন্ন মশলা এবং প্রক্রিয়াজাত খাবারে দীর্ঘস্থায়ীভাবে উচ্চ থাকে.

এই আবেদনের নোটে, a liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the determination of Rhodamine B in food was established using the WAYEAL LCMS-TQ9200 liquid chromatography-tandem mass spectrometry systemএই পদ্ধতিটি কার্যকরভাবে খাদ্য ম্যাট্রিক্স হস্তক্ষেপ দূর করার সময় লক্ষ্য বিশ্লেষকের দক্ষ নিষ্কাশন, সুনির্দিষ্ট বিচ্ছেদ এবং সংবেদনশীল পরিমাণ নির্ধারণ অর্জন করে।এটি খাদ্যের মধ্যে রোডামিন বি এর দ্রুত স্ক্রিনিং এবং সঠিক পরিমাণ নির্ধারণের জন্য নির্ভরযোগ্য প্রযুক্তিগত সহায়তা প্রদান করে, যার ফলে কার্যকর খাদ্য নিরাপত্তা তত্ত্বাবধান সহজতর হবে।

মূলশব্দঃ খাদ্য নিরাপত্তা, রোডামিন বি, এলসিএমএস/এমএস

1. যন্ত্রপাতি এবং রিএজেন্টস

1.১ যন্ত্রের বিন্যাস

টেবিল ১ যন্ত্রের কনফিগারেশনের তালিকা

1.২ রিএজেন্ট এবং স্ট্যান্ডার্ড তালিকা

টেবিল ২ রিএজেন্ট এবং স্ট্যান্ডার্ড তালিকা

1.৩ পরীক্ষামূলক উপকরণ এবং সহায়ক সরঞ্জাম

ভর্টেক্স মিক্সার

উচ্চ গতির সেন্ট্রিফুগ

বিশ্লেষণগত ভারসাম্য

সলিড ফেজ এক্সট্রাকশন (SPE) ম্যানিফোড (ভ্যাকুয়াম পাম্প সহ)

নাইট্রোজেন বাষ্পীভবন

অরবিটাল শেকার

2পরীক্ষার পদ্ধতি

2.১ দ্রবণ প্রস্তুতি

2.1.১ পানিতে ০.১% ফর্মিক এসিডঃ ১ মিলিগ্রাম ফর্মিক এসিড ৫০০ মিলিগ্রাম পানিতে ঢালুন, ভালভাবে মিশ্রিত করুন এবং পানি দিয়ে শেষ ভলিউম ১০০০ মিলিগ্রাম পর্যন্ত আনুন।

2.1.2 অ্যাসেটোনাইট্রিলের মধ্যে 0.1% ফর্মিক এসিডঃ অ্যাসেটোনাইট্রিলের 500 মিলিগ্রামে 1 মিলিগ্রাম ফর্মিক এসিড স্থানান্তর করুন, পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন এবং অ্যাসেটোনাইট্রিলের সাথে 1000 মিলিগ্রাম ভলিউম পর্যন্ত ফিক্স করুন।

2.1.3 পানিতে ৫০% মেথানলঃ ৫০০ মিলিলিটার মেথানল এক লিটারের ভলিউম্যাট্রিক কলসে সঠিকভাবে স্থানান্তর করুন, তারপর পানি দিয়ে ভলিউম পর্যন্ত ফিক্স করুন।

2.1.4 0.1% ফর্মিক এসিড সহ পানিতে 50% মেথানলঃ 50% মেথানল সহ পানিতে 500 মিলিগ্রামে 1 মিলিগ্রাম ফর্মিক এসিড স্থানান্তর করুন, পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন এবং পানিতে 50% মেথানল সহ 1000 মিলিগ্রাম ভলিউম পর্যন্ত দ্রবীভূত করুন।

2.1.5 মেথানলে ৫% অ্যামোনিয়াঃ ৫ মিলিলিটার অ্যামোনিয়া সলিউশন ১০০ মিলিলিটার ভলিউম্যাট্রিক কলসে স্থানান্তর করুন, মেথানল দিয়ে ভলিউম পর্যন্ত হ্রাস করুন এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন।

2.২ নমুনা প্রাক চিকিত্সা

2.2.১ নমুনা সংগ্রহ

একটি 50 মিলি প্লাস্টিকের সেন্ট্রিফুগ টিউবে 1 গ্রাম মরিচ পাউডার নমুনা সঠিকভাবে ওজন করুন। 0.1% ফর্মিক অ্যাসিড ধারণকারী 50% মেথানল জলীয় সমাধানের 10.0 মিলি যোগ করুন এবং ভালভাবে মিশ্রিত করুন।দুটি সিরামিক হোমোজেনাইজার যোগ করুন, তারপর একটি ঘূর্ণি মিশ্রক উপর 15 মিনিটের জন্য ঘূর্ণি। 8000 r/min 10min জন্য centrifuge। supernatant (এক্সট্রাক্ট স্তর) 3mL স্থানান্তর এবং একটি 0 মাধ্যমে ফিল্টার।বিশুদ্ধকরণের আগে 45μm জৈবিক-ফেজ ফিল্টার ঝিল্লি.

2.2.২ নমুনা বিশুদ্ধকরণ

NovaPre MCX সলিড ফেজ এক্সট্রাকশন (SPE) কার্টিজ কন্ডিশনারিংঃ ব্যবহারের আগে কার্টিজটি ধারাবাহিকভাবে 3 মিলিলিটার মেথানল এবং 3 মিলিলিটার পানি দিয়ে সক্রিয় করুন।

নোভাপ্রে এমসিএক্স সলিড ফেজ এক্সট্রাকশন (এসপিই) কার্টিজটিতে এক্সট্র্যাক্টের ১.০ মিলিলিটার সঠিকভাবে স্থানান্তর করুন।এবং 3 মিলিমিটার মেথানল. মেথানল সলিউশনে 6 এমএল অ্যামোনিয়া দিয়ে লক্ষ্য বিশ্লেষকটি এলুয়েট করুন এবং এলুয়েটটি সংগ্রহ করুন। 45 ডিগ্রি সেলসিয়াসে নাইট্রোজেনের প্রবাহের অধীনে প্রায় শুকনো হওয়া পর্যন্ত এলুয়েটটি বাষ্পীভূত করুন। অবশিষ্টটি 0 এ দ্রবীভূত করুন।প্রাথমিক গতিশীল পর্যায়ে 5 এমএল, একটি 0.22μm জৈব-ফেজ ফিল্টার ঝিল্লি মাধ্যমে ফিল্টার, এবং তারপর যন্ত্রগত বিশ্লেষণের জন্য ফিল্টার ইনজেকশন।

2.৩ পরীক্ষার শর্তাবলী

2.3.১ এইচপিএলসি শর্তাবলী

ক্রোম্যাটোগ্রাফিক কলামঃ C18, 1.7μm, 2.1*50mm;
মোবাইল ফেজঃ ফেজ এঃ পানিতে ০.১% ফর্মিক এসিড; ফেজ বিঃ অ্যাসেটোনাইট্রিলের মধ্যে ০.১% ফর্মিক এসিড;
প্রবাহের হারঃ ০.৪ এমএল/মিনিট;
কলামের তাপমাত্রাঃ ৪০ ডিগ্রি সেলসিয়াস;
ইনজেকশন ভলিউমঃ 1μL।

2.3.২ ম্যাস স্পেকট্রোমেট্রি শর্তাবলী

টেবিল ৩ যৌগিক ভর স্পেকট্রোমেট্রি পরামিতি

দ্রষ্টব্যঃ * কোন্টিফায়ার আয়ন।

3পরীক্ষার ফলাফল

3.১ স্ট্যান্ডার্ড ক্রোম্যাটোগ্রাম

রোডামিন বি এর সনাক্তকরণ ৭ মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন হয়। যেমন চিত্র ১-এ দেখানো হয়েছে, যৌগিক শিখরটি ভাল শিখর আকৃতি এবং সন্তোষজনক প্রতিক্রিয়া প্রদর্শন করে।যা পরীক্ষামূলকভাবে নির্ধারণের জন্য প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে.

চিত্র ১ রোডামিন বি এর ক্রোম্যাটোগ্রাম

3.২ লিনিয়ার রেঞ্জ

স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা প্রস্তুত করার জন্য রোডামিন বি স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের যথাযথ পরিমাণ সঠিকভাবে স্থানান্তরিত এবং প্রাথমিক মোবাইল ফেজের সাথে দ্রবীভূত করা হয়েছিল। রৈখিক পরিসীমা ছিল 0.1 ¢ 10 এনজি / এমএল।রৈখিক ফলাফল এবং পরিচিত ঘনত্বের মধ্যে বিচ্যুতি সর্বোচ্চ অনুমোদিত বিচ্যুতির মধ্যে ছিলনির্ধারণের সহগ (আর২) ০ এর চেয়ে বড় ছিল।999, যা ভাল রৈখিকতা নির্দেশ করে।

চিত্র ২ রোডামিন বি স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ

3.৩ পরিমাপের সীমা এবং সনাক্তকরণের সীমা

এই পদ্ধতিতে, রোডামিন বি এর জন্য সনাক্তকরণের সীমা (এলওডি) এবং পরিমাণের সীমা (এলওকিউ) যথাক্রমে 0.1 এনজি / এমএল এবং 0.5 এনজি / এমএল হিসাবে নির্ধারণ করা হয়েছিল।সংশ্লিষ্ট সংকেত-শব্দ অনুপাত (S/N) নিচের টেবিলে সংক্ষিপ্ত করা হয়েছেএলওডি-তে এস/এন অনুপাত ৩ ছাড়িয়ে গেছে এবং এলওকিউ-তে ১০ ছাড়িয়ে গেছে।

টেবিল ৪ পরিমাপের সীমা এবং সনাক্তকরণের সীমা

চিত্র 3 রোডামিন বি এর জন্য LOD এ সংকেত-শব্দ অনুপাত (0.1ng/mL)

চিত্র 4 রোডামিন বি এর জন্য এলওকিউ-তে সিগন্যাল-রশ্মি অনুপাত (0.5 এনজি/এমএল)

3.4 পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা

স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন তিনটি ঘনত্ব (0.5, ২, এবং ৫ এনজি/এমএল) পরপর ছয়বার ইনজেকশন করা হয়। ফলাফলগুলি নিচের টেবিলে দেখানো হয়েছে।মাঝারি, এবং উচ্চ ঘনত্ব সব 5% এর মধ্যে ছিল যা পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

টেবিল ৫. নিম্ন, মাঝারি এবং উচ্চ ঘনত্বের রোডামিন বি এর পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষা

চিত্র ৫ ৬ টি পরপর ইনজেকশন এর ক্রোম্যাটোগ্রাম ০.৫ এনজি/এমএল রোডামিন বি

চিত্র ৬ ২ এন জি/এম এল রোডামিন বি এর পরপর ৬ টি ইনজেকশনের ক্রোম্যাটোগ্রাম

চিত্র ৭ ৫ এন জি/এম এল রোডামিন বি এর পরপর ৬ টি ইনজেকশনের ক্রোম্যাটোগ্রাম

3.5 স্পাইক রিকভারি

রোডামিন বি এর ঘনত্ব ২ এনজি/এমএল বৃদ্ধি করার জন্য নমুনা এ এর সাথে একটি স্ট্যান্ডার্ড সমাধান যুক্ত করা হয়েছিল। তারপরে ছয়টি পুনরাবৃত্তি ইনজেকশন বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। প্রাপ্ত পুনরুদ্ধারটি 105.7% ছিল RSD 1.473%,পদ্ধতি গ্রহণযোগ্যতার মানদণ্ড পূরণ করে.

3.6 বহন করা

10 এনজি/এমএল স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন ইনজেকশন করার পর, একটি ফাঁকা দ্রাবক ইনজেকশন করা হয়। ফলাফলগুলি নীচের চিত্রে দেখানো হয়েছে।ব্লাঙ্কে বহনযোগ্যতা সর্বনিম্ন ক্যালিব্রেশন স্ট্যান্ডার্ডের 10% এরও কম ছিল (0.1 এনজি/এমএল), যা পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

চিত্র ৮ যৌগের ফাঁকা ক্রোম্যাটোগ্রাম

3.7 নমুনা পরীক্ষা

নমুনা এ-তে রোডামিন বি ঘনত্ব পদ্ধতি সনাক্তকরণ সীমা (এমডিএল) এর নিচে ছিল।

চিত্র 9 নমুনা এ-তে রোডামিন বি এর ক্রোম্যাটোগ্রাম

4উপসংহার

এই গবেষণায়, রোডামিন বি নির্ধারণের জন্য WAYEAL LCMS-TQ9200 সিস্টেম ব্যবহার করে একটি তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ট্যান্ডেম মাস স্পেকট্রোমেট্রি (LC-MS/MS) পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছিল।প্রাপ্ত তথ্য দেখায় যে পদ্ধতিটি ভাল প্রতিসমতার সাথে ক্রোম্যাটোগ্রাফিক পিক উত্পাদন করে এবং কোন লেইং নেই, এবং সংবেদনশীলতা পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে। নির্ধারণের সহগ (আর 2) 0 এর চেয়ে বড় ছিল।999নিম্ন, মাঝারি এবং উচ্চ ঘনত্বের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা (আরএসডি) 5% এর মধ্যে ছিল এবং ফাঁকা জায়গায় স্থানান্তর সর্বনিম্ন ক্যালিব্রেশন মানের 10% এরও কম ছিল.এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে পদ্ধতিটি, যখন WAYEAL LC-MS/MS সিস্টেমের সাথে যুক্ত হয়, তখন লক্ষ্য বিশ্লেষকগুলির জন্য রুটিন গুণগত এবং পরিমাণগত সনাক্তকরণের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে সক্ষম।