প্যানাক্স নটোগিনসেং সাপোনিনগুলিতে রজন অবশিষ্টাংশের নির্ধারণ Wayeal গ্যাস ক্রোম্যাটোগ্রাফ GC6100 দ্বারা

গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি প্যানাক্স নোটোগিনসেং স্যাপোনিনে রজনের অবশিষ্টাংশ সনাক্তকরণে একটি সমালোচনামূলকভাবে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। Panax notoginsengস্যাপোনিনগুলি কার্ডিওভাসকুলার এবং সেরিব্রোভাসকুলার ওষুধ যেমন Xueshuantong-এর মূল কাঁচামাল হিসাবে কাজ করে এবং তাদের পরিশোধন প্রক্রিয়া সাধারণত ম্যাক্রোপোরাস শোষণ রজন নিযুক্ত করে। যাইহোক, এই প্রক্রিয়াটি এন-হেক্সেন, বেনজিন, টলুইন, জাইলিন, স্টাইরিন এবং ডিভিনাইলবেনজিন সহ ক্ষতিকারক জৈব দ্রাবক অবশিষ্টাংশ প্রবর্তন করতে পারে। এই অবশিষ্টাংশগুলি মানবদেহের জন্য সম্ভাব্য বিষাক্ত; অতএব, কঠোর পর্যবেক্ষণের জন্য সংবেদনশীল এবং সঠিক বিশ্লেষণী পদ্ধতি স্থাপন করা অপরিহার্য।

এই গবেষণাটি চীনা ফার্মাকোপিয়ার সর্বশেষ সংস্করণ অনুসারে পরিচালিত হয়েছিল, ওয়েয়েল প্রযুক্তি GC6100 গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফ ব্যবহার করে একটি ফ্লেম আয়নাইজেশন ডিটেক্টর (এফআইডি) দিয়ে সজ্জিত এবং প্যানাক্স নোটোগিনে রজন অবশিষ্টাংশ নির্ধারণের জন্য একটি স্বয়ংক্রিয় হেডস্পেস স্যাম্পলারের সাথে মিলিত হয়েছে।

মূলশব্দ: Panax notoginseng saponins; অবশিষ্ট দ্রাবক; গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি; FID আবিষ্কারক; হেডস্পেস

1. পরীক্ষা পদ্ধতি

1.1 উপকরণ কনফিগারেশন

সারণী 1 গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফের কনফিগারেশন তালিকা

1.2 পরীক্ষামূলক উপকরণ এবং সহায়ক সরঞ্জাম

রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড: এন-হেক্সেন, বেনজিন, টলুইন, পি-জাইলিন, ও-জাইলিন, স্টাইরিন, 1,2-ডাইথাইলবেনজিন এবং ডিভিনাইলবেনজিন স্ট্যান্ডার্ড সলিউশনের প্রত্যয়িত রেফারেন্স উপকরণ (ঘরে কেনা), রেফ্রিজারেশনের অধীনে সিল করা পাত্রে সংরক্ষণ করা এবং আলো থেকে সুরক্ষিত;

এন,এন-ডাইমিথাইলফর্মাইড;

ক্যারিয়ার গ্যাস: উচ্চ-বিশুদ্ধতা নাইট্রোজেন;

হাইড্রোজেন জেনারেটর;

বায়ু জেনারেটর;

স্বয়ংক্রিয় হেডস্পেস নমুনা;

হেডস্পেস শিশি: গ্লাস হেডস্পেস শিশি (20 মিলি)।

1.3 পরীক্ষার শর্ত

1.3.1 হেডস্পেস স্যাম্পলারের জন্য রেফারেন্স শর্তাবলী

ওভেনের তাপমাত্রা: 90°গ;

ইনকিউবেশন সময়: 30 মিনিট;

ইনজেকশন ভালভ তাপমাত্রা: 110°গ;

স্থানান্তর লাইন তাপমাত্রা: 120°গ;

ইনজেকশন ভলিউম: 1.0mL (লুপ ভলিউম)

1.3.2 গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফের জন্য রেফারেন্স অপারেটিং শর্ত

বিশ্লেষণাত্মক কলাম: FFAP কৈশিক কলাম, 30m×0.25 মিমি×0.25μমি

তাপমাত্রা প্রোগ্রাম: প্রাথমিক কলাম তাপমাত্রা 60°C 16 মিনিট ধরে, তারপর 200 এ র‌্যাম্প করে°C 20 হারে°C/min, এবং 2 মিনিট ধরে রাখা;

কলাম প্রবাহ হার: 1.0 মিলি/মিনিট;

ইনলেট তাপমাত্রা: 240°গ;

ডিটেক্টর তাপমাত্রা: 300°গ;

বায়ু প্রবাহ হার: 300mL/মিনিট;

হাইড্রোজেন প্রবাহ হার: 40mL/মিনিট;

মেকআপ প্রবাহ হার: 20mL/মিনিট;

2:1 এর একটি বিভক্ত অনুপাত সহ স্প্লিট ইনজেকশন।

1.4 সমাধান প্রস্তুতি

1.4.1 রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড স্টক সমাধানের প্রস্তুতি

n-হেক্সেন, বেনজিন, টলুইন, পি-জাইলিন, ও-জাইলিন, স্টাইরিন, 1,2-ডাইথাইলবেনজিন এবং ডিভিনাইলবেনজিনের রেফারেন্স মানগুলির যথাযথ পরিমাণে সঠিকভাবে ওজন করুন এবং 20 সমন্বিত একটি দ্রবণ প্রস্তুত করতে N,N-ডাইমিথাইলফর্মাইডে দ্রবীভূত করুন।μg/mL প্রতিটি এন-হেক্সেন, টলুইন, পি-জাইলিন, ও-জাইলিন, স্টাইরিন, 1,2-ডাইথাইলবেনজিন, এবং ডিভিনাইলবেনজিন এবং 4μবেনজিনের g/mL, যথাক্রমে, রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড স্টক সমাধান হিসাবে পরিবেশন করে।

1.4.2 মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের প্রস্তুতি

রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড স্টক সলিউশনের 2mL সঠিকভাবে একটি 50mL ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে স্থানান্তর করুন, 25% N,N-ডাইমিথাইলফর্মাইড দ্রবণ দিয়ে ভলিউমে পাতলা করুন এবং ভালভাবে মিশ্রিত করুন। এই দ্রবণের 5mL নির্ভুলভাবে একটি 20mL হেডস্পেস শিশি, সীল-এ স্থানান্তর করুন এবং মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড কার্যকরী সমাধান পাওয়া যায়।

1.4.3 সনাক্তকরণ সীমা পরীক্ষার জন্য স্ট্যান্ডার্ড সমাধানের প্রস্তুতি

রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড স্টক সলিউশনের 2mL সঠিকভাবে একটি 500mL ভলিউম্যাট্রিক ফ্লাস্কে স্থানান্তর করুন, 25% N,N-ডাইমিথাইলফর্মাইড দ্রবণ দিয়ে ভলিউমে পাতলা করুন এবং ভালভাবে মিশ্রিত করুন। এই দ্রবণের 5mL সঠিকভাবে একটি 20mL হেডস্পেস শিশি, সীল-এ স্থানান্তর করুন এবং সনাক্তকরণ সীমা পরীক্ষার জন্য আদর্শ সমাধান পাওয়া যায়।

2. ফলাফল এবং আলোচনা

2.1 রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের গুণগত বিশ্লেষণ

চিত্র 1 ফাঁকা দ্রাবকের ক্রোমাটোগ্রাম

চিত্র 2 মিক্সড স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ক্রোমাটোগ্রাম

সারণি 2 মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ক্রোমাটোগ্রাফিক প্যারামিটার

দ্রষ্টব্য: উপরের ক্রোমাটোগ্রামগুলি দেখায় যে সমস্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরগুলি একে অপরের থেকে ভালভাবে আলাদা, 1.5 এর বেশি রেজোলিউশন সহ, পরীক্ষামূলক বিশ্লেষণের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

2.2 পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষা

চিত্র 3 পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষার জন্য মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ওভারলেড ক্রোমাটোগ্রাম (n=5)

সারণী 3 পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষার জন্য মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনের ক্রোমাটোগ্রাফিক পরামিতি

দ্রষ্টব্য: মিশ্র স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনটি ক্রমাগত 5 বার ইনজেকশন করা হয়েছিল এবং পিক অঞ্চলগুলির RSD ছিল≤1.5%।

2.3 সনাক্তকরণ সীমা

চিত্র 4 সনাক্তকরণ সীমা পরীক্ষার জন্য স্ট্যান্ডার্ড সমাধানের ক্রোমাটোগ্রাম

সারণী 4 সনাক্তকরণ সীমা পরীক্ষার জন্য স্ট্যান্ডার্ড সমাধানের ক্রোমাটোগ্রাফিক পরামিতি

দ্রষ্টব্য: সনাক্তকরণের সীমা (LOD) 3-এর একটি সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত (S/N) এ নির্ধারিত হয়েছিল, এবং 10-এর একটি সংকেত-থেকে-শব্দ অনুপাত (S/N) এ পরিমাণ নির্ধারণের সীমা (LOQ) নির্ধারণ করা হয়েছিল৷ LOD এবং LOQ উভয় মানই স্ট্যান্ডার্ডের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে পাওয়া গেছে৷

2.4 নমুনা বিশ্লেষণ

সঠিকভাবে প্রতিটি নমুনার প্রায় 0.1g ওজন করুন (যথাক্রমে 0.1017g, 0.1026g, এবং 0.1023g) পৃথক 20mL হেডস্পেস শিশিতে, তারপর সঠিকভাবে 5mL 25% N,N-dimethylformamide এর দ্রবণ যোগ করুন, প্রতিটি শিশিতে এবং ভালোভাবে শেক করুন।

চিত্র 5 তিনটি নমুনা সমাধানের ওভারলেড ক্রোমাটোগ্রাম

চিত্র 6 নমুনা সমাধান এবং রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড সমাধানের ওভারলেড ক্রোমাটোগ্রাম

দ্রষ্টব্য: নমুনায় এন-হেক্সেন, বেনজিন, টলুইন, পি-জাইলিন, ও-জাইলিন, স্টাইরিন, 1,2-ডাইথাইলবেনজিন বা ডিভিনাইলবেনজিন সনাক্ত করা যায়নি।

3. উপসংহার

এই গবেষণায়, একটি Wayeal GC6100 গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফ একটি শিখা ionization ডিটেক্টর (FID) দিয়ে সজ্জিত এবং একটি স্বয়ংক্রিয় হেডস্পেস স্যাম্পলারের সাথে প্যানাক্স নোটোগিনসেং স্যাপোনিন নমুনায় রজন অবশিষ্টাংশ নির্ধারণের জন্য নিযুক্ত করা হয়েছিল। পরীক্ষামূলক ফলাফলগুলি দেখায় যে সমস্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখরগুলি ভালভাবে পৃথক করা হয়েছিল, 1.5 এর বেশি রেজোলিউশন সহ, বিশ্লেষণমূলক উদ্দেশ্যে প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে। এই পদ্ধতির পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা এবং সনাক্তকরণ সীমা পরীক্ষার ফলাফলগুলি সমস্ত নির্দিষ্ট প্রয়োজনীয়তা পূরণ করেছে। পরীক্ষার নমুনাগুলিতে এন-হেক্সেন, বেনজিন, টলুইন, পি-জাইলিন, ও-জাইলিন, স্টাইরিন, 1,2-ডাইথাইলবেনজিন বা ডিভিনাইলবেনজিন সনাক্ত করা যায়নি, যা সন্তোষজনক ফলাফল নির্দেশ করে। এই ফলাফলগুলি দেখায় যে Wayeal GC6100 গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফ Panax notoginseng saponin নমুনায় রজন অবশিষ্টাংশ নির্ধারণের জন্য বিশ্লেষণাত্মক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে সম্পূর্ণরূপে সক্ষম।

4. মনোযোগ

দ্রাবক এবং মানক সমাধানের প্রস্তুতির সাথে জড়িত সমস্ত অপারেশন, সেইসাথে নমুনা প্রিট্রিটমেন্ট, একটি ফিউম হুডে করা উচিত। ত্বক এবং পোশাকের সংস্পর্শ এড়াতে ল্যাবরেটরি নিরাপত্তা বিধি অনুসারে উপযুক্ত ব্যক্তিগত সুরক্ষামূলক সরঞ্জাম পরিধান করা উচিত।