ডাই-তে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম নির্ধারণের জন্য নোভাক্রোম ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম ব্যবহার

হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়ামের উচ্চ বিষাক্ততা, কার্সিনোজেনিসিটি এবং জৈব-সঞ্চয়ী সম্ভাবনা রয়েছে। যদি রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়ামের পরিমাণ অনুমোদিত সীমার বেশি হয়, তবে এটি কেবল উৎপাদন পরিবেশকে দূষিত করবে না এবং টেক্সটাইল রঞ্জন ও প্রক্রিয়াকরণের সময় অপারেটরদের স্বাস্থ্যের জন্য বিপদ ডেকে আনবে না, বরং পোশাক এবং গৃহস্থালীর সামগ্রীর মতো শেষ পণ্যের মাধ্যমে ত্বকের সংস্পর্শে আসবে বা খাদ্য শৃঙ্খলে প্রবেশ করবে, যার ফলে ত্বকের আলসার, শ্বাসকষ্টজনিত রোগ এবং এমনকি ক্যান্সার সহ স্বাস্থ্য ঝুঁকি তৈরি হবে। এদিকে, বর্জ্য জলের সাথে নিঃসৃত অতিরিক্ত হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম জলজ এবং মাটির বাস্তুতন্ত্রের ক্ষতি করতে পারে, অণুজীবের কার্যকলাপকে বাধা দিতে পারে এবং উদ্ভিদ ও প্রাণীর বৃদ্ধিতে প্রভাব ফেলতে পারে। অতএব, পরিবেশগত নিয়মাবলী বাস্তবায়ন, পণ্যের গুণমান নিশ্চিত করা এবং জনস্বাস্থ্য ও পরিবেশগত ভারসাম্য রক্ষার জন্য রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়ামের পরিমাণ কঠোরভাবে নির্ধারণ ও নিয়ন্ত্রণ করা প্রয়োজনীয় ব্যবস্থা।

এই নিবন্ধে, একটি নোভাক্রোম অ্যানায়ন ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম (HS×2026 অনুসারে রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম নির্ধারণের জন্য নোভাক্রোম অ্যানায়ন ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম এইচএস×Cr, 4.0‑250mm) এবং ওয়েয়াল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফ ব্যবহার করে জিবি/টি 47088×2026 অনুসারে রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম নির্ধারণ করা হয়েছে, যা এইচপিএলসি দ্বারা রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম নির্ধারণের জন্য একটি রেফারেন্স সরবরাহ করে।

মূল শব্দ: আয়ন ক্রোমাটোগ্রাফি কলাম; রঞ্জক পদার্থ; জিবি/টি 47088-2026; হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম; হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি; এইচএস-5এ-সিআর।

1. পরীক্ষা

1.1 প্রধান যন্ত্র ও বিকারক

লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফ: ওয়েয়াল হাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফ, একটি ইউভি ডিটেক্টর সহ সজ্জিত;

অ্যানায়ন ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম: এইচএস×2026 অনুসারে রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম নির্ধারণের জন্য নোভাক্রোম অ্যানায়ন ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম এইচএস×Cr, 4.0‑250mm;

অ্যানায়ন গার্ড কলাম: এইচএস×5এজি, 4‑30mm;

হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (1000mg/L);

ডিপোটাসিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট;

অনার্দ্র অ্যামোনিয়াম সালফেট;

অ্যামোনিয়া দ্রবণ;

মিথানল;

ফসফরিক অ্যাসিড;

সি18 কার্টিজ (এসপিই): 5 গ্রাম, 20 মিলি।

ফসফেট বাফার দ্রবণ: 22.8 গ্রাম ডিপোটাসিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট (কে₂এইচপিও₄·3এইচ₂ও, আপেক্ষিক আণবিক ভর 228) ওজন করুন, 1000 মিলি জলে দ্রবীভূত করুন, ফসফরিক অ্যাসিড দিয়ে পিএইচ 8.0±0.1 এ সামঞ্জস্য করুন এবং একটি আল্ট্রাসনিক জেনারেটরে ডিগ্যাস করুন। ফসফেট বাফার দ্রবণ ব্যবহারের আগে তাজাভাবে প্রস্তুত করা উচিত, অথবা 0-4 °সি তাপমাত্রায় 7 দিন পর্যন্ত রেফ্রিজারেশনে সংরক্ষণ করা উচিত; ব্যবহারের আগে, এটিকে ঘরের তাপমাত্রায় আনুন এবং আবার ডিগ্যাস করুন।

ডিসপোজেবল সিরিঞ্জ (20 মিলি);

1.2 দ্রবণ প্রস্তুতি

1.2.1 মধ্যবর্তী স্টক দ্রবণ প্রস্তুতি

100 মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে 1 মিলি হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (1000mg/L) পিভেট করুন, ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে চিহ্ন পর্যন্ত পাতলা করুন এবং 10mg/L এর হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম স্ট্যান্ডার্ড স্টক দ্রবণ পান।

10 মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে 1 মিলি হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম স্ট্যান্ডার্ড স্টক দ্রবণ (10mg/L) পিভেট করুন, ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে চিহ্ন পর্যন্ত পাতলা করুন এবং 1mg/L এর হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং দ্রবণ পান।

1.2.2 স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং দ্রবণের সিরিজ প্রস্তুতি

25 মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কের একটি সেটে 0.2 মিলি, 0.5 মিলি, 1.0 মিলি, 2.5 মিলি এবং 5 মিলি হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম স্ট্যান্ডার্ড ইন্টারমিডিয়েট দ্রবণ (1mg/L) পিভেট করুন, ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে আয়তন স্থির করুন এবং ভালভাবে মেশান; এটি পাঁচটি ভিন্ন ঘনত্বের একটি স্ট্যান্ডার্ড সিরিজ প্রস্তুত করে। স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ সিরিজের জন্য ভর ঘনত্বের সারণী নীচে সারণী 1 এ দেখানো হয়েছে।

সারণী 1 ক্যালিব্রেশন কার্ভের জন্য ঘনত্ব গ্রেডিয়েন্ট সিরিজ

1.3 যন্ত্র অপারেটিং শর্তাবলী

কলাম তাপমাত্রা: 30°সি;

এলুয়েন্ট: 0.25mol/L অ্যামোনিয়াম সালফেট জলীয় দ্রবণ, অ্যামোনিয়া জল দিয়ে পিএইচ 8.0±0.2 এ সামঞ্জস্য করা হয়েছে;

প্রবাহের হার: 1 মিলি/মিনিট;

ইনজেকশন ভলিউম: 50μএল;

শনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য: 372nm।

1.4 প্রিট্রিটমেন্ট

1.4.1 নিষ্কাশন

100 মিলি গ্রাউন্ড-গ্লাস স্টপারযুক্ত কনিক্যাল ফ্লাস্কে 1.0 গ্রাম পরীক্ষার নমুনা (0.0001 গ্রাম পর্যন্ত) ওজন করুন, সঠিকভাবে 50.0 মিলি ফসফেট বাফার দ্রবণ যোগ করুন এবং 20 মিনিটের জন্য একটি আল্ট্রাসনিক বাথে আল্ট্রাসনিক নিষ্কাশন করুন। নিষ্কাশনটি একটি সিরিঞ্জ ফিল্টার দিয়ে ফিল্টার করুন এবং পরে ব্যবহারের জন্য আলাদা করে রাখুন। যদি পরীক্ষার নমুনা সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হয়, তবে পরিস্রাবণ ধাপটি বাদ দেওয়া যেতে পারে।

1.4.2 পরিষ্কারকরণ

সলিড ফেজ এক্সট্রাকশন ম্যানিফোল্ডে সি18 কার্টিজ মাউন্ট করুন এবং 20 মিলি মিথানল, 40 মিলি জল এবং 40 মিলি ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে পর্যায়ক্রমে কার্টিজটি কন্ডিশন করুন। কার্টিজে সঠিকভাবে 10.0 মিলি নিষ্কাশন স্থানান্তর করুন, 30 মিলি ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে এলুট করুন, সমস্ত এলুয়েট সংগ্রহ করুন, এলুয়েটটি 50 মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে স্থানান্তর করুন এবং ফসফেট বাফার দ্রবণ দিয়ে আয়তন পূরণ করুন।

2. ফলাফল এবং আলোচনা

2.1 ক্যালিব্রেশন কার্ভ পরীক্ষা

চিত্র 1 ক্যালিব্রেশন কার্ভ পরীক্ষার ওভারলেড ক্রোমাটোগ্রাম

সারণী 2 হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়ামের রৈখিকতা

2.2 সনাক্তকরণ সীমা পরীক্ষা– 0.004mg/L হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম ঘনত্বের পরীক্ষা

চিত্র 2 0.004mg/L এ হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়ামের ক্রোমাটোগ্রাম

সারণী 3 তাত্ত্বিক সনাক্তকরণ সীমার জন্য পরীক্ষার ডেটা

2.3 নমুনা এবং স্পাইকড নমুনা পরীক্ষা

চিত্র 3 রঞ্জক নমুনার ক্রোমাটোগ্রাম।

দ্রষ্টব্য: স্ট্যান্ডার্ডের প্রয়োজনীয়তা অনুসারে প্রিট্রিটমেন্ট এবং ইন্সট্রুমেন্টাল বিশ্লেষণের পরে, তিনটি নমুনার কোনোটিই সনাক্ত করা যায়নি।

চিত্র 4 2.5mg/kg এ স্পাইকড নমুনার ক্রোমাটোগ্রাম।

সারণী 4 2.5mg/kg এ স্পাইকড নমুনার জন্য পরীক্ষার ডেটা

চিত্র 5 2.5mg/kg এ স্পাইকড নমুনার 7টি ধারাবাহিক ইনজেকশনের ওভারলেড ক্রোমাটোগ্রাম।

সারণী 5 2.5mg/kg এ স্পাইকড নমুনার 7টি ধারাবাহিক ইনজেকশনের জন্য পরীক্ষার ডেটা

3. উপসংহার

জিবি/টি 47088×2026 অনুসারে রঞ্জক পদার্থে হেক্সাভ্যালেন্ট ক্রোমিয়াম নির্ধারণের জন্য নোভাক্রোম অ্যানায়ন ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম এইচএস×5এ‑সিআর (4×250মিমি) ব্যবহার করে, পদ্ধতিটি চমৎকার রৈখিকতা এবং সন্তোষজনক সনাক্তকরণ সীমা প্রদর্শন করেছে। 2.5mg/kg এ স্পাইকড নমুনার জন্য পুনরুদ্ধার 95.8 % থেকে 96.8 % পর্যন্ত ছিল, যা স্ট্যান্ডার্ডের প্রয়োজনীয়তা সম্পূর্ণরূপে পূরণ করে।