ওয়েয়াল এলসিএমএস-টিকিউ৯২০০ লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি-ট্যান্ডেম মাস স্পেকট্রোমেট্রি সিস্টেমের মাধ্যমে সয়াবিন তেলে ইথাইল মালটলের পরিমাণ নির্ধারণ

ইথাইল মাল্টোল খাদ্য শিল্পে খাদ্য পণ্যগুলিতে মিষ্টি, ফলযুক্ত এবং ক্রিমযুক্ত নোটগুলিকে জোরদার করতে এবং সামঞ্জস্য করতে একটি অত্যন্ত দক্ষ এবং বিস্তৃত বর্ণালী স্বাদ বাড়ান এবং সংশোধনকারী হিসাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।খাদ্য সংযোজন ব্যবহারের জন্য চীনের জাতীয় খাদ্য নিরাপত্তা মানদণ্ড (GB 2760-2024) অনুযায়ী, ইথাইল মাল্টোলকে নির্দিষ্ট খাদ্যশ্রেণীতে উৎপাদনের চাহিদা অনুযায়ী উপযুক্ত মাত্রায় ব্যবহারের অনুমতি দেওয়া হয়েছে।

যাইহোক, যেহেতু ইথাইল মাল্টোল কার্যকরভাবে তেলগুলিতে অক্সিডেটিভ অফ-আস্বাদগুলি আড়াল করতে পারে এবং তাদের স্বাদ উন্নত করতে পারে,সাম্প্রতিক বছরগুলোতে খাদ্যতালিকাগত তেলগুলিতে এর অননুমোদিত সংযোজন জড়িত একাধিক ঘটনা ঘটেছেতাই, সঠিক, সংবেদনশীল,খাদ্য নিরাপত্তা নিশ্চিত করার জন্য সয়াবিন তেল এবং অন্যান্য ভোজ্য তেলগুলিতে ইথাইল ম্যালটোলের অবৈধ সংযোজন পর্যবেক্ষণের জন্য একটি দক্ষ বিশ্লেষণ পদ্ধতির গুরুত্বপূর্ণ ব্যবহারিক গুরুত্ব রয়েছে, ভোক্তাদের অধিকার রক্ষায় এবং বাজার ব্যবস্থা বজায় রাখতে।

সয়াবিন তেলের একটি জটিল ম্যাট্রিক্স রচনা রয়েছে, মূলত ট্রাইগ্লিসারাইড, ফ্রি ফ্যাটি অ্যাসিড, ফসফোলিপিড এবং প্রাকৃতিক টোকোফেরল নিয়ে গঠিত।এই সমবায় উপাদান বিশ্লেষণের সময় উল্লেখযোগ্য ম্যাট্রিক্স হস্তক্ষেপ হতে পারে, ইথাইল মাল্টোলের লক্ষ্য বিশ্লেষক সনাক্তকরণকে মারাত্মকভাবে প্রভাবিত করে।তরল ক্রোমাটোগ্রাফি - ট্যান্ডেম মাস স্পেকট্রোমেট্রি তরল ক্রোমাটোগ্রাফির চমৎকার বিচ্ছেদ ক্ষমতাকে ট্যান্ডেম মাস স্পেকট্রোমেট্রির উচ্চ নির্বাচনী এবং উচ্চ সংবেদনশীলতার সাথে একত্রিত করেএই কৌশলটি খাদ্য পণ্যগুলিতে অবৈধ সংযোজনগুলির বিশ্লেষণ এবং সনাক্তকরণের জন্য একটি শক্তিশালী সরঞ্জাম হয়ে উঠেছে।

কীওয়ার্ডঃএলসিএমএস, সয়াবিন তেল, ইথাইল ম্যালটোল।

1যন্ত্রপাতি এবং রিএজেন্টস

1.1 এলসিএমএসের কনফিগারেশন তালিকা

টেবিল ১ যন্ত্রের কনফিগারেশনের তালিকা

1.২ রিএজেন্ট এবং স্ট্যান্ডার্ড

টেবিল ২ রিএজেন্ট এবং স্ট্যান্ডার্ডের টেবিল

1.3 পরীক্ষামূলক উপকরণ এবং সহায়ক সরঞ্জাম

আল্ট্রাসোনিক ক্লিনার

ভর্টেক্স মিক্সার

উচ্চ গতির সেন্ট্রিফুগ

2পরীক্ষার পদ্ধতি

2.১ তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফি শর্তাবলী

কলামঃ সি১৮, ১.৭ মাইক্রোমিটার, ২.১×৫০ মিমি

মোবাইল ফেজঃ A: পানিতে 0.1% ফর্মিক এসিড; B: মেথানলে 0.1% ফর্মিক এসিড

প্রবাহের হারঃ ০.৩ মিলি/মিনিট

কলামের তাপমাত্রাঃ ৪০ ডিগ্রি সেলসিয়াস

ইনজেকশন ভলিউমঃ 2μL

2.২ প্রাক-পরিশোধ পদ্ধতি

নমুনার ১০ গ্রাম (০.০১ গ্রাম পর্যন্ত) সঠিকভাবে ওজন করুন এবং এটিকে ৫০ মিলিগ্রাম পলিপ্রোপিলিন সেন্ট্রিফুগ টিউবে স্থানান্তর করুন। একটি পাইপেট ব্যবহার করে ১০ মিলিগ্রাম মেথানল সঠিকভাবে যোগ করুন, ২ মিনিট ধরে ঘূর্ণি করুন,এবং 9 এ সেন্ট্রিফুগ,000rpm/min 10 মিনিটের জন্য 4°C এ। সুপারনেটেন্টকে 20mL গ্রেডিয়েটেড বন্ধ টেস্ট টিউবটিতে স্থানান্তর করুন। অবশিষ্ট তেল স্তরটি আরেকটি 10mL মেথানল দিয়ে এক্সট্রাকশন পুনরাবৃত্তি করুন।সুপারনেটেন্টসকে একত্রিত করুন, এবং মেথানল দিয়ে 20mL পর্যন্ত দ্রবীভূত করুন। একটি মাইক্রোপোরাস ঝিল্লি (0.22μm, জৈবিক পর্যায়ে) মাধ্যমে সমাধান ফিল্টার করুন এবং তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফি-ট্যান্ডেম ভর বর্ণনাকারী বিশ্লেষণের জন্য এটি ব্যবহার করুন।

2.৩ দ্রবণ প্রস্তুতি

2.3.1 ইথাইল ম্যালটোল স্ট্যান্ডার্ড সলিউশনঃ ১০০μg/mL

2.3.২ ইথাইল মাল্টোল স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং সলিউশনঃইথাইল মল্টল স্ট্যান্ডার্ড স্টক সলিউশনটি ধাপে ধাপে মেথানল দিয়ে দ্রবীভূত করুন ১.২৫ মাইক্রোগ্রাম/এমএল, ২.৫ মাইক্রোগ্রাম/এমএল, ৫ মাইক্রোগ্রাম/এমএল, ২৫ মাইক্রোগ্রাম/এমএল এবং ৫০ মাইক্রোগ্রাম/এমএল ঘনত্বে স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন প্রস্তুত করতে।সঠিকভাবে 10g ওজন করুন (সঠিকভাবে 0.01 গ্রাম) পরীক্ষার নমুনার সাথে মিলে নেগেটিভ নমুনার 200μL প্রতিটি স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন আলাদাভাবে যোগ করা হয় এবং পরীক্ষার নমুনার সাথে একযোগে এক্সট্রাকশনের মাধ্যমে মিশ্রণগুলি প্রক্রিয়া করা হয়।তারপর 12 এর চূড়ান্ত ঘনত্বের সাথে কাজ সমাধান প্রস্তুত.5ng/mL, 25ng/mL, 50ng/mL, 250ng/mL, এবং 500ng/mL। এই সমাধানগুলি ব্যবহারের আগে অবিলম্বে প্রস্তুত করুন।

2.3.৩ ০.১% ফর্মিক এসিড জলীয় দ্রবণঃ1 মিলিগ্রাম ফর্মিক অ্যাসিড নিন এবং 1000 মিলিগ্রাম পানিতে দ্রবীভূত করুন। ব্যবহারের আগে একটি ঝিল্লি (0.22μm, জলীয় পর্যায়ে) মাধ্যমে ফিল্টার করুন।

2.3.4 মেথানল সলিউশনে 0.1% ফর্মিক এসিডঃ১ মিলিগ্রাম ফর্মিক অ্যাসিড নিন এবং মেথানল দিয়ে ১,০০০ মিলিগ্রামে হ্রাস করুন। ব্যবহারের আগে একটি ঝিল্লি (0.22μm, জৈবিক পর্যায়ে) দিয়ে ফিল্টার করুন।

3পরীক্ষার ফলাফল

3.১ স্ট্যান্ডার্ড ক্রোম্যাটোগ্রাম

ইথাইল মাল্টোল সামগ্রী নির্ধারণ 7 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন হয়েছিল, ভাল শীর্ষ আকৃতি এবং যৌগ প্রতিক্রিয়া সহ, পরীক্ষামূলক বিশ্লেষণের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

চিত্র ১ ইথাইল মাল্টোল ক্রোম্যাটোগ্রাম (২৫০ এনজি/এমএল)

3.২ লিনিয়ার রেঞ্জ

স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখাটি ইথাইল মাল্টোল স্ট্যান্ডার্ড সলিউশনের সিরিয়াল হ্রাসের মাধ্যমে প্রস্তুত করা হয়েছিল।রৈখিক সনাক্তকরণের ফলাফল এবং পরিচিত ঘনত্বের মধ্যে সর্বাধিক অনুমোদিত বিচ্যুতির চেয়ে কম বিচ্যুতি সহ. সমস্ত R2 মান 0 অতিক্রম করেছে.9999, যা চমৎকার রৈখিকতা নির্দেশ করে।

টেবিল ৩ রৈখিকতা পরিসীমা যৌগগুলির টেবিল

চিত্র ২ যৌগগুলির রৈখিকতার ফলাফল

3.3 LOD এবং LOQ

এই পদ্ধতিতে, ইথাইল ম্যালটোলের সিগন্যাল-শব্দ অনুপাত (এস/এন) 12.5 এনজি/এমএল এ 10 এর চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি। যখন এস/এন = 10 ক্যোন্টিটেশনের তাত্ত্বিক সীমা (এলওকিউ) হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়,এবং S/N = 3 তাত্ত্বিক সনাক্তকরণের সীমা (LOD) হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়গণনা করা সনাক্তকরণের সীমা (এলওডি) 1.07 এনজি / এমএল এবং পরিমাণের সীমা (এলওকিউ) 3.56 এনজি / এমএল।

টেবিল ৪: যৌগের এলওকিউ এবং এলওকিউ

যৌগিক	সংকেত-শব্দ অনুপাত (S/N)	সনাক্তকরণের সীমা (এনজি/এমএল)	পরিমাণের সীমা (এনজি/এমএল)
ইথাইল মাল্টোল	35.079	1.07	3.56

চিত্র 3 যৌগিক LOQ এর ক্রোম্যাটোগ্রাম

3.4 নির্ভুলতা

ইথাইল ম্যালটোল স্ট্যান্ডার্ড সলিউশনে ব্লাঙ্ক সলিউন্ট এবং নেগেটিভ নমুনা নেওয়া হয় যাতে 25ng/mL এর চূড়ান্ত ঘনত্ব প্রস্তুত করা যায় এবং নির্ভুলতা মূল্যায়নের জন্য 7 বার পরপর ইনজেকশন করা হয়।ফলাফলগুলি নিচের টেবিলে দেখানো হয়েছেইথাইল মাল্টোলের আরএসডি ৩% এর মধ্যে ছিল, যা ≤১৫% এর স্ট্যান্ডার্ড নির্ভুলতার প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

টেবিল ৫ যৌগের নির্ভুলতা

যৌগিক	নমুনা	আরএসডি
ইথাইল মাল্টোল	মিশ্রিত মেথানল	2.407%
	স্পাইকড সয়াবিন তেল	2৯১৫%

চিত্র 4 মেথানল স্পাইকড নমুনার যথার্থ ক্রোম্যাটোগ্রাম

চিত্র 5 সয়াবিন তেল স্পাইক নমুনার যথার্থ ক্রোম্যাটোগ্রাম

3.5 পুনরুদ্ধারের হার

একটি 100μg/mL ইথাইল মাল্টোল স্ট্যান্ডার্ড সলিউশনকে সয়াবিন তেল দিয়ে 25ng/mL পর্যন্ত হ্রাস করা হয়। নমুনা প্রাক চিকিত্সা, নিষ্কাশন এবং পরিস্রাবণের পরে,পুনরুদ্ধারের হার তুলনা করার জন্য সাতটি পরপর ইনজেকশন করা হয়েছিলফলাফলগুলি নিচের টেবিলে দেখানো হয়েছে। ইথাইল মাল্টোলের পুনরুদ্ধারের হার 102.53% ছিল, যা 80% থেকে 120% পর্যন্ত গ্রহণযোগ্য পুনরুদ্ধারের পরিসীমা পূরণ করে।

টেবিল ৬ রিকভারি রেট

যৌগিক	স্পাইকড কনসেন্ট্রেশন (এনজি/এমএল)	পুনরুদ্ধার (%)
ইথাইল মাল্টোল	25	102৫৩%

3.6 ফাঁকা অবশিষ্টাংশ

স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার সর্বোচ্চ পয়েন্ট (৫০০ এনজি/এমএল) ইনজেকশন করার পরে, একটি ব্ল্যাক রিএজেন্ট ইনজেকশন করা হয়েছিল। গণনার পরে কোনও ব্ল্যাক রিটার্ন সনাক্ত করা হয়নি।

চিত্র ৬ ফাঁকা অবশিষ্টাংশের ক্রোম্যাটোগ্রাম

3.7 নমুনা পরীক্ষা

প্রাক-পরিশোধের পরে, একটি নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডের সয়াবিন তেলের নমুনা ইনজেকশন করা হয়েছিল এবং কোনও লক্ষ্যযুক্ত যৌগ সনাক্ত করা হয়নি।

চিত্র ৭ নমুনা পরীক্ষার ক্রোম্যাটোগ্রাম

4উপসংহার

এই পদ্ধতিতে সয়াবিন তেলের ইথাইল মাল্টোল নির্ধারণের জন্য ওয়ায়েলের এলসিএমএস-টিকিউ 9200 তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফি-ট্যান্ডেম মাস স্পেকট্রোমেট্রি সিস্টেম ব্যবহার করা হয়।তথ্য দেখায় যে পদ্ধতির ক্রোম্যাটোগ্রাফিক পিকগুলি কোনও রেলিং ছাড়াই ভাল পিকের আকৃতি দেখায়, এবং সংবেদনশীলতা প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে। রৈখিক সংশ্লিষ্টতা সহগগুলি 0 এর চেয়ে বড়।9999, নির্ভুলতা 3% এর মধ্যে এবং স্পাইক পুনরুদ্ধারের হার 100% থেকে 105% এর মধ্যে রয়েছে। উচ্চ ঘনত্বের নমুনাগুলির জন্য কোনও সিস্টেম বহনযোগ্যতা পর্যবেক্ষণ করা হয়নি। এই ফলাফলগুলি দেখায় যে পদ্ধতি,Wayeal's LC-MS/MS সিস্টেমের সাথে সজ্জিত, নমুনায় লক্ষ্য বিশ্লেষকের জন্য রুটিন গুণগত এবং পরিমাণগত সনাক্তকরণের প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে।

TQ9200 তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফি-মাস স্পেকট্রোমেট্রি (LC-MS/MS) সিস্টেম

LC3400 উচ্চ ইনজেকশন পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা Hplc তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফি যন্ত্র 75MPa

ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পে 42 এমপিএ আইসোক্র্যাটিক হাই প্রেসার এইচপিএলসি সিস্টেম