তরল ক্রোম্যাটোগ্রাফি দ্বারা পানীয়ের মধ্যে ক্যাফিনের পরিমাণ নির্ধারণ

ক্যাফেইন একটি প্রাকৃতিক মিথাইলজ্যান্থিন অ্যালকালয়েড যা কফি বিন, চা পাতা এবং কোকো বিনের মতো কাঁচামালগুলিতে ব্যাপকভাবে উপস্থিত থাকে। এটি কার্বনেটেড পানীয়, এনার্জি ড্রিঙ্কস, চা-ভিত্তিক পানীয় এবং কফি পানীয় সহ বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ পানীয়গুলিতে একটি মূল কার্যকরী সংযোজন এবং বৈশিষ্ট্যযুক্ত স্বাদ যৌগ হিসাবে কাজ করে। ক্যাফেইনের পরিমিত গ্রহণ শারীরিক প্রভাব ফেলতে পারে যেমন মনকে সতেজ করা এবং ক্লান্তি দূর করা। তবে, অতিরিক্ত এবং দীর্ঘমেয়াদী সেবন সহজেই প্রতিকূল প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করতে পারে, যার মধ্যে বুক ধড়ফড়, অনিদ্রা এবং স্নায়বিক অতি-উত্তেজনা অন্তর্ভুক্ত। উপরন্তু, সংবেদনশীল জনগোষ্ঠী—যেমন গর্ভবতী মহিলা, শিশু এবং কার্ডিওভাসকুলার রোগে আক্রান্ত ব্যক্তিরা—এর সহনশীলতার সীমা আরও কম। ফলস্বরূপ, বিভিন্ন দেশে খাদ্য সুরক্ষা মানগুলি পানীয়গুলিতে ক্যাফেইনের পরিমাণে স্পষ্ট নিয়ন্ত্রক সীমা স্থাপন করেছে।

চীনে, "পানীয়গুলিতে ক্যাফেইন নির্ধারণ" (GB 5009.139-2014) শিরোনামে জাতীয় খাদ্য সুরক্ষা মানটি পানীয় ম্যাট্রিক্সে ক্যাফেইনের পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য বিধিবদ্ধ ভিত্তি হিসাবে কাজ করে। হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC), এর চমৎকার রেজোলিউশন, ম্যাট্রিক্স হস্তক্ষেপ প্রতিরোধের শক্তিশালী ক্ষমতা এবং উচ্চ পরিমাণগত নির্ভুলতার কারণে, বিভিন্ন যৌগিক পানীয়, দুধ-যুক্ত পানীয় এবং ভেষজ কার্যকরী পানীয় সহ জটিল-ম্যাট্রিক্স নমুনার বিশ্লেষণের জন্য পছন্দের পদ্ধতি হয়ে উঠেছে। এই পরীক্ষাটি জাতীয় মান GB 5009.139-2014-এ নির্দিষ্ট করা হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি পদ্ধতি অনুসারে পরিচালিত হয়েছিল, পানীয় নমুনার জন্য একটি নমুনা প্রাক-চিকিৎসা এবং লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফিক পৃথকীকরণ/সনাক্তকরণ প্রোটোকল স্থাপন করে, এবং বিভিন্ন ধরণের পানীয়গুলিতে ক্যাফেইনের গুণগত সনাক্তকরণ এবং পরিমাণগত বিশ্লেষণ সম্পন্ন করে।

মূল শব্দ: হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি; ক্যাফেইন; পানীয়; পরিমাণ নির্ধারণ।

১. যন্ত্র এবং বিকারক

১.১ লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেম কনফিগারেশন তালিকা

সারণী ১. যন্ত্র কনফিগারেশন তালিকা

১.২ বিকারক এবং স্ট্যান্ডার্ড তালিকা

সারণী ২. বিকারক এবং স্ট্যান্ডার্ড তালিকা

১.৩ পরীক্ষামূলক উপকরণ এবং সহায়ক সরঞ্জাম

আল্ট্রাসনিক ক্লিনার;

ভর্টেক্স মিক্সার;

০.৪৫ μm মাইক্রোপোরাস জলীয়-ফেজ ফিল্টার মেমব্রেন।২.১ স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণের প্রস্তুতি

২.১.১ ক্যাফেইন স্ট্যান্ডার্ড স্টক দ্রবণ (২.০মিগ্রা/মিলি): একটি ১০ মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে নির্ভুলভাবে ২০ মিলিগ্রাম ক্যাফেইন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড (০.১ মিলিগ্রাম পর্যন্ত) ওজন করুন, মিথানল দিয়ে দ্রবীভূত করুন এবং আয়তন পর্যন্ত পূরণ করুন। ৪°C তাপমাত্রায় রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করুন। মেয়াদ ৬ মাস।

২.১.২ ক্যাফেইন স্ট্যান্ডার্ড ইন্টারমিডিয়েট দ্রবণ (২০০ μg/mL): একটি ৫০ মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে নির্ভুলভাবে ৫.০ মিলি ক্যাফেইন স্ট্যান্ডার্ড স্টক দ্রবণ (২.১.১) স্থানান্তর করুন এবং জল দিয়ে আয়তন পর্যন্ত পূরণ করুন। ৪°C তাপমাত্রায় রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করুন। মেয়াদ ১ মাস।

২.১.৩ ক্যাফেইন স্ট্যান্ডার্ড ওয়ার্কিং দ্রবণ ক্যালিব্রেশন কার্ভের জন্য: পৃথক ১০ মিলি ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে ক্যাফেইন স্ট্যান্ডার্ড ইন্টারমিডিয়েট দ্রবণের (২.১.২) ০.৫ মিলি, ১.০ মিলি, ২.০ মিলি, ৫.০ মিলি এবং ১০.০ মিলি স্থানান্তর করুন এবং জল দিয়ে আয়তন পর্যন্ত পূরণ করুন। এই স্ট্যান্ডার্ড সিরিজের ফলস্বরূপ ঘনত্বগুলি যথাক্রমে ১০.০ μg/mL, ২০.০ μg/mL, ৪০.০ μg/mL, ১০০ μg/mL এবং ২০০ μg/mL। ব্যবহারের ঠিক আগে প্রস্তুত করুন।২৮৪২.৩০৪২.২.১ কোলা-টাইপ পানীয়

(ক) ডিগ্যাসিং: ৪০°C তাপমাত্রায় একটি আল্ট্রাসনিক ক্লিনার ব্যবহার করে ৫ মিনিটের জন্য নমুনাটি সনিকেট করুন।২.২.২ দুধ-যুক্ত লিকুইড কফি এবং চা পণ্য২৮৪২.৩০৪২.৩ পরীক্ষা শর্তাবলী

২.৩.১ ক্রোমাটোগ্রাফিক শর্তাবলীমোবাইল ফেজ: মিথানল/জল = ২৪/৭৬ (v/v)কলাম তাপমাত্রা: ২৫°Cইনজেকশন ভলিউম: ১০ μL৩.১ ব্ল্যাঙ্ক৩.২ লিনিয়ার রেঞ্জ

চিত্র ২. ক্যাফেইন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের লিনিয়ার ফলাফল

সারণী ৩. ক্যাফেইন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের লিনিয়ার রেঞ্জ

বিশ্লেষ্য২৮৪২.৩০৪কোরিলেশন কোএফিসিয়েন্ট (R)

ক্যাফেইন

১০–২০০

১.০০০০০

৩.৩ পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা

চিত্র ৩. ক্যাফেইন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা ক্রোমাটোগ্রাম (n = ৬)

সারণী ৪. ক্যাফেইন রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা ক্রোমাটোগ্রাফিক প্যারামিটার (n = ৬)নং।নমুনার নামপিক এরিয়া (mAU·s)

১

ক্যাফেইন ১০০μg/mL

৭.১৯২২৮৪২.৩০৪২

৭.১৬৭

২৮৪৩.২২৩৭.১৫৮

২৮৪৬.৩৩১

৪

৭.১৬৭

২৮৪১.১৪৯

৫

৭.১৬৭

২৮৪৩.৬৪১

এসডি

০.০১৪

১৮.৫৭২

এন.এ.

৩

এন.এ.

৩

১০৪০১

১.১৫৮সারণী ৮. একটি নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডের মিল্ক টি পানীয় নমুনার স্পাইকিং রিকভারির ক্রোমাটোগ্রাফিক ফলাফল (স্পাইকিং ঘনত্ব: ৪০μg/mL)

৯৪.৯৯%সারণী ৮. একটি নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডের মিল্ক টি পানীয় নমুনার স্পাইকিং রিকভারির ক্রোমাটোগ্রাফিক ফলাফল (স্পাইকিং ঘনত্ব: ৪০μg/mL)

৩

ক্যাফেইন

সিগন্যাল-টু-নয়েজ রেশিও

গণনাকৃত ঘনত্ব

সনাক্তকরণের সীমা (mg/kg)

					মেসেজ রেখে যান আমরা শীঘ্রই আপনাকে কল করব! আপনার বার্তা 20-3,000 অক্ষরের মধ্যে হতে হবে! অনুগ্রহপূর্বক আপনার ইমেইল চেক করুন! জমা দিন অধিক তথ্য ভালো যোগাযোগের সুবিধা দেয়। মি মি মিসেস ঠিক আছে সফলভাবে দাখিল হল! আমরা শীঘ্রই আপনাকে কল করব! ঠিক আছে মেসেজ রেখে যান আমরা শীঘ্রই আপনাকে কল করব! আপনার বার্তা 20-3,000 অক্ষরের মধ্যে হতে হবে! অনুগ্রহপূর্বক আপনার ইমেইল চেক করুন! জমা দিন অনুগ্রহ করে আপনার সঠিক ইমেইল এবং বিস্তারিত প্রয়োজনীয়তা (২০-৩০০০ অক্ষর) দিন। ঠিক আছে